ELISA定性测定的结果是基于对样本中待测抗原或抗体的存在与否作出“有”或“无”的判断，通常用“阳性”和“阴性”来表示。其中，“阳性”意味着样本在检测系统中呈现反应，而“阴性”则表示无反应。通过定性判断方法，还可以获得半定量结果，即通过滴度来表示反应的强度，实际上这仍然是一个定性实验。在这种半定量测定中，样本经过系列稀释后进行实验，呈现阳性反应的稀释度即为滴度。根据滴度的高低，可以判断样本的反应性强弱，这种方法相较于仅观察未稀释样本的颜色深浅提供了更具定量意义的信息。在间接法和夹心法ELISA中，阳性孔的颜色深度通常高于阴性孔，而在竞争法ELISA中，阴性孔的颜色却高于阳性孔。两类反应的结果判断方法如下所述。

1. 间接法和夹心法

这类反应的定性结果可以通过肉眼观察判定。若样本无色或接近无色，则判为阴性；若显色明显，则为阳性。然而，在ELISA实验中，正常人血清反应后可能出现一定的背景颜色，背景的深浅因试剂成分和实验条件而异，因此必须进行阴性对照。阴性对照应为不含受检物的正常血清或类似物。在判断结果时，应以显色深于阴性对照作为阳性的标志。虽然目视法简便明了，但具有一定的主观性。因此，建议在条件允许的情况下使用比色计测量吸光值，以获取更客观的数据。

2. 阳性判定值法

阳性判定值（cut-off value）通常为阴性对照A值加上一个特定常数，作为判断结果阳性或阴性的标准。使用此方法判断结果时，实验条件必须严密控制，试剂的制备需要标准化，阳性和阴性对照品需符合一定规格，并且应严格遵循操作规范。阳性判定值的常数是通过对大量样本实验得到的。以某种HBsAg检测的试剂盒为例，其中阴性对照为不含HBsAg的复合人血浆，而阳性对照则标明HBsAg含量为P=9±2ng/ml。每次实验设定两个阳性对照和三个阴性对照，通过测得的A值可以计算得到阴性对照的平均A值（NC X）和阳性对照的平均A值（PC X）。两个平均值的差（P-N）必须大于特定值（如0.400），实验才有效。

3. 标本/阴性对照比值法

在实验条件（包括试剂）难以保持恒定的情况下，这种判断方法比较适合。通过获取样本（S）和阴性对照（N）的A值后，计算S/N值。需要注意的是，N指的是不含受检物质的人血清。部分试剂盒的阴性对照可能是低蛋白的缓冲液，因而其反应产生的背景可能低于正常人血清的背景，因此在此类情况中，如果N<0.05（或其它值），则按0.05计算，否则将导致假阳性结果。

4. 竞争法

在竞争法ELISA中，阴性孔的颜色深于阳性孔，其颜色强度取决于反应中酶结合物的浓度和添加的竞争抑制物的量。通常情况下，阴性对照的吸光度调节在10-15之间，以确保反应敏感。由于肉眼难以分辨弱阳性反应与阴性对照间的显色差异，竞争法ELISA普遍采用比色计进行测定。计算方案主要有两种：阳性判定值法与抑制率法。

5. 抑制率法

抑制率表示样本在竞争结合中对阴性反应显色的抑制程度，其计算公式为：抑制率（%）=（阴性对照A值 - 样本A值）/阴性对照A值。一般规定，抑制率≥50%为阳性，<50%为阴性。

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